Tabela 1
Liczba kopii cząsteczek DNA podwaja się z każdym cyklem PCR
Cykle | Zwielokrotnianie DNA |
1 0
2 1
3 2
4 4
5 8
6 16
7 32
8 64
9 128
10 256
11 512
12 1024
13 2048
14 4096
15 8192
16 16,536
17 32,768
18 65,536
19 131,072
20 262,144
21 524,288
22 1,048,576
23 2,097,152
24 4,194,304
25 8,388,608
26 16,777,216
27 33,554,432
28 67,108,864
29 134,217,728
30 268,435,456
31 536,870,912
32 1,073,741,824
33 2,147,483,648
34 4,294,967,296
35 8,589,934,592
36 17,179,869,184
37 34,359,738,368
38 68,719,476,736
39 137,438,953,472
40 274,877,906,944
41 549,755,813,888
42 1,099,511,627,776
43 2,199,023,255,553
44 4,398,046,511,104
45 8,796,093,022,208
46 17,592,186,044,416
47 35,184,372,088,832
48 70,368,744,177,664
49 140,737,488,355,328
50 281,474,676,710,656
Tabela 2
Wyniki identyfikacji ekstrudatów. zbożowych z dodatkiem tkanki zwierzęcej.
Nr próby | Produkt | Dodatek mięsa % | Identyfikacja składnika mięsnego |
1 | K.k+”surimi” drób | 0 | _ _ |
2 | K.k+drób | 0 | _ _ |
3 | K.k+wołowina „surimi” Kl.II i wieprzowina „surimi” | 0 | _ _ |
4 | K.K+wieprzowina | 0 | _ _ |
5 | K.k+”surimi”wołowina | 0 | _ _ |
6 | K.k+wieprzowina | 4 | + |
7 | K.k+wołowina | 4 | _ (wieprz) |
8 | K.k+”surimi” drób | 4 | + |
9 | K.k+”surimi”wołowina kl.II | 4 | _ (wieprz.) |
10 | K.k+”surimi”wieprzowina | 4 | + |
11 | K.k+wołowina kl.I | 4 | + |
12 | K.k+drób | 4 | + |
13 | K.k+MOM wieprzowina | 8 | + |
14 | K.k+drób | 8 | + |
15 | K.k+”surimi„wieprzowina | 8 | + |
16 | K.k+”surimi„wieprzowina | 12 | + |
17 | K.k+”surimi” drób | 12 | + |
18 | K.k+MOM wołowina | 12 | _ (wieprz.) |
19 | K.k+MOM wieprzowina | 12 | ! |
20 | K.k+eks”surimi” wołowina | 12 | + |
21 | K.k+”surimi „drób | 16 | + |
22 | K.k+eks.”surimi „wołowna | 16 | + |
23 | K.k+MOM wieprzowina | 16 | + |
24 | K.k+wołowina | 8 | + |
25 | K.k+wieprzowina „surimi” | 28 | + |
26 | Próba kontrolna | 0 | _ _ |
K.k. - kaszka kukurydziana,
MOM - Mięso odkostnione mechanicznie,
„Surimi” - mięso przemywane
+ zgodność ze składem deklarowanym;,
- brak zgodności
- - brak szukanego DNA
! brak izolacji DNA
primer SIM niespecyficzny
(forward primer SIM) | (5´-GACCTCCCAGCTCCATCAAA CAAACATCT CATCTTGATGAAA-3´), |
wołowina primer B
(reverse primers) | (5´-CTAGAAAAGTGTAAGACCCGTA ATATAAG-3´), |
wieprzowina primery P
(reverse primers) | 5´GCTGATAGTAGATTTGTGATGA
CCGTA -3 ´), |
drób primer C
(reverse primers) | 5´-AAGATACAGATGAAGAATGAGGCG -3 ´) |
Tabela 3 Primery wykorzystane do reakcji PCR(Matsunaga 1999)
Tabela 4 Różnice w ilości izolowanego DNA z przetworzonej żywności (Spiegelhalter
i In. z, 2001)
Produkt | Ilość wyizolowanego DNA | Produkt | Ilość wyizolowanego DNA |
Soy Beans | +++ | Mąka sojowa | +++ |
Posiłki sojowe | +++ | Tofu | +++ |
Napoje sojowe | ++ | Natto | ++ |
Sosy sojowe | + | Ciastka | + |
Lecytyna | + | Crude oil | + |
Olej rafinowany | (+) | Czekolada | ++ |
Kukurydza | +++ | Kukurydza konserwowa | +++ |
Chrupki kukurydziane | ++ | Żwirek kukurydziany | +++ |
Skrobia kukurydziana | + | Płatki kukurydziane | + |
HiFruc
syrop kukurydziany | (+) | Kotlety wegeteriańskie | +++ |
Pomidory | ++ | Pasta pomidorowa | ++ |
Ketchup | ++ | Miód-Canola | + |
+++=>100ng/ųl,
++=5-100ng/ ųl,
+=<5 ng/ ųl,
(+)=DNA nie zawsze izolowane
CAŁKOWICIE LUB CZĘŚCIOWO SKLEIKOWANY EKSTRUDAT
Schemat 1 Etapy procesu wytwarzania uszlachetnionych produktów ekstrudowanych (Michniewicz 1993)
Schemat 2. Produkcja wyrobów snacks-pellets (Jurga 1993)
1.Mieszanie mąki,
2.Ekstruder-żelatynizer,
3. Ekstruder-formujący,
4.Suszenie,
5.Prażenie i przyprawianie,
6.Pakowanie;
Schemat 3 Produkcja płatków zbożowych i wyrobów breakfest cereals (Jurga 1993).
1. Mieszanie surowców,
2. Ekstruzja-gotowanie,
3. Suszenie,
4. Stabilizowanie,
5. Płatkowanie,
6. Przyprawianie i chłodzenie,
7.Pakowanie;
Fotografia 1 Ekstrudaty wykorzystane do badań z dodatkami tkanek zwierzęcych.
Fotografia 2 Ekstruder laboratoryjny typu 20DN (Brabander RFN) w czasie pracy.(zdjęcie z archiwum dr M. Wianeckiego)
Fotografia 3
278 wołowina
378 wieprzowina
M- marker, Wp - wzorzec wieprzowiny, Wł- wzorzec wołowiny,1-wieprzowina”surimi” 8%, 2-wołowina MOM 12%
Fotografia 4
227bp
278bp
378bp
M - marker, próby od 1- K.k+”surimi” drób 0%,2- K.k+drób 0% 3-K.k+wołowina „surimi” Kl.II i wieprzowina „surimi” 0%,4- K.K+wieprzowina 0%, 5- K.k+”surimi ”wołowina 0%, 6- K.k+wieprzowina4%,7-K.k+ wieprzowina , 8- K.k+”surimi” drób 4%, 9- wieprzowina, 10-K.k+”surimi”wieprzowina 4%,11- K.k+wołowina kl.I 4%,12-K.k+drób 4%,13- K.k+MOM wieprzowina 8%,14-K.k+ dr…ób 8%, 15-K.k+ MOM wieprzowina 8%,Wł-wzorzec wołowiny. Wp-wzorzec wieprzowiny, Ku-wzorzec drobiu.
Fotografia 5
378
278
227
Wp - wzorzec wieprzowiny, Ku-wzorzec drobiu, Wł - wzorzec wołowiny,
16-K.k+” surimi” wieprzowe 12%,17-K.k+”surim”,drobiowe 12%,18-K.k+MOM wołowina 12%, 18-K.k + MOM wieprzowina 12%,19-brak izolacji,20- K.k+ekstra ”surimi” wołowina12%,21-K.k+”surimi drób 16%,22-K.k+ekstra „surimi”wołowe16%M-marker (Gdańsk 100-500)
Fotografia 6
227
378
278
M-marker (Gdańsk 100-500), Wł—wzorzec wołowina, Wp - wzorzec wieprzowina, Ku-wzorzec drób,22- K.k + ekstra „surimi”wołowe16%,23-K.k+ MOM wieprzowina 16%,24-K.k+wołowina 8%,25-Próba kontrolna.
Copyright © 2008-2010 EPrace oraz autorzy prac.